澳门太阳娱乐雄性基因RAPD标记的研究

澳门太阳娱乐雄性基因RAPD标记的研究
姚春潮
【摘要】:本研究以美味澳门太阳娱乐20个品种(株系)、中华澳门太阳娱乐15个品种(株系)及美味澳门太阳娱乐海瓦德×秦雄201人工控制杂交群体14个单株共计49份材料为试材,首先以亲本海瓦德和秦雄201的DNA为模板,对随机引物进行筛选,然后以F_1代6个植株的DNA等量混合的雌性DNA样与雄性DNA样为模板,对引物进一步筛选,最后用杂交组合F_1代个体DNA为模板,获得了与澳门太阳娱乐雄性基因连锁的RAPD标记S1032_(850)和S79_(750),并对所得标记的有效性在中华澳门太阳娱乐和美味澳门太阳娱乐上进行了验证。同时对获得的与澳门太阳娱乐雄性基因连锁的RAPD标记S1032_(850)进行了测序及序列相似性分析。取得的主要结果如下: 1.通过对300个随机引物的筛选和研究,得到了与澳门太阳娱乐雄性基因连锁的RAPD标记S1032_(850)和S79_(750)。在中华澳门太阳娱乐、美味澳门太阳娱乐雌雄个体上进一步验证发现:标记S1032_(850)存在于研究所用的22株雄株中,在27株雌性个体中只有4株存在标记片段S1032_(850);标记S79_(750)在22株雄株中有19株存在(在F_1代6株雄株有5株存在),在27株雌性个体中有13株存在标记片段S79_(750)(在F_1代6株雌株有1株存在)。表明澳门太阳娱乐雄性基因连锁的标记S1032_(850)与实际符合率高于标记S79_(750)。 2.从美味澳门太阳娱乐“秦雄201”亲本和中华澳门太阳娱乐“江西78-1”中分别回收了特异标记S1032_(850)的DNA片段,对它们进行了克隆、测序,获得了S1032_(850)标记的核苷酸序列,其由867 bp的特定碱基序列组成。将来自于中华澳门太阳娱乐雄性标记S1032_(850)的特定碱基序列片段登陆Genbank,其登陆号为AY336259。为进一步将RAPD标记转化为SCAR标记和利用特定碱基序列及基因连锁图谱克隆雄性基因奠定基础。 3.利用BLAST工具对美味澳门太阳娱乐和中华澳门太阳娱乐特异标记S1032_(850)的DNA片段碱基序列进行了相似性分析,两序列的相似性达97%。在CBI库中,利用BLAST工具对美味澳门太阳娱乐特异标记S1032_(850)的DNA序列相似性分析发现,该序列与其它生物体DNA序列同源性较小,为澳门太阳娱乐基因组所特有。

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