贮藏期澳门太阳娱乐果实表面溃疡病病原菌的快速检测方法研究

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朱丹 曹凡 高贵田 王铎 徐雅芬 杜莹琳 张鑫 李朝正 孙强 周敏娜
【摘要】:为建立澳门太阳娱乐果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德澳门太阳娱乐为材料,用King’s B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西澳门太阳娱乐Psa的hrp W保守区设计2对特异引物进行巢式PCR扩增,并对扩增产物进行测序。结果表明,从4个澳门太阳娱乐贮藏库抽取40个样品,其中8个样品检测出阳性扩增;对特异扩增得到的550bp的hrp W序列进行BLAST对比分析,发现该序列与丁香假单胞杆菌澳门太阳娱乐致病性变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)的hrp W序列同源性为99%。此外,本试验建立的巢式PCR检测方法对Psa的检出限为103cfu·m L~(-1),检测方法特异性强,灵敏度高,能减少假阳性的出现,保证了快速检测结果的可靠性,为控制澳门太阳娱乐果实传播Psa提供了理论依据。

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